造血干細胞-表面標志
由于造血組織中造血干細胞在形態學方面無法與其它單核細胞區別,而且數量極少,這為造血干細胞的分離純化并對其功能分析和分化的研究造成極大困難。
由于單克隆抗體技術的進步,流式細胞儀(FACS)的應用,以及對小鼠和人造血干細胞表面標志的研究,取得了很大進展,為造血細胞的分離純化及鑒定創造了條件。 1.Thy-1與絲裂原(wheatgermagglutininWGA)Visseer等發現小鼠骨髓中造血干細胞對WGA有高親和性。利用這一特性,應用FACS自骨髓中分離造血干細胞應及核系Mac-1等譜系抗原與WGA反應性相結合,即可自骨髓中Lin-/WGA 細胞群中分離造血干細胞,也獲得良好結果。 也有學者發現正常小鼠骨髓細胞中,也能表達低密度Thy-1抗原(Thy-11)。如與上述標志組合,即自骨髓Thy-11。Lin-WGA 細胞群中,分離造血干細胞,可用于對造血細胞的功能分析。 2.干細胞抗原(stemcellantigen-1Sca-1)有學者制備一種抗原前T細胞雜交瘤的單克隆抗體,用這種單抗檢出的抗原分子稱為干細胞抗原-1(Sca-1)。其后有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1 細胞群中,可分離純人造血干細胞。 3.原癌基因(c-kit)最近證明造血干細胞與c-kit基因密切相關。C-kit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細胞膜上,其后證明它的配體分子是造血干細胞因子(stemcellfactorSCF)。它是信號傳導分子,對造血干細胞的分化具有重要作用。小鼠多能干細胞表面分子標志可視為Thy-1Io、WGA 、c-kit 、Lin-。 c-kit分子可高頻率表達于多能干細胞表面,但骨髓中c-kit 細胞可分化為各種血細胞,而胸腺中c-kit細胞可分化為淋巴細胞,不能分化為髓系細胞,所以胸腺內c-kit 細胞,可能是淋巴樣干細胞。 4.CD34對人體造血干細胞表面標志的研究,是用單克隆抗體CD34證明的。CD34單克隆抗體檢測的抗原即為CD34分子。自人骨髓細胞中應用FACS可分離純化CD34 細胞群,如與造血因子共同體外培養可獲得含有各種血細胞的混合集落,所以CD34 細胞為骨髓中造血干細胞,CD34抗原可視為骨髓造血細胞標志之一。