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DNA條形碼:認(rèn)知物種新方式?

文章來源:科技日報(bào)

■ 新聞緣起

  近日,以“生命條形碼與人類未來”為主題的中國科協(xié)第31期新觀點(diǎn)新學(xué)說學(xué)術(shù)沙龍?jiān)诒本┲袊茖W(xué)院動(dòng)物研究所舉行。

  分類學(xué)家、免疫學(xué)家、昆蟲學(xué)家等幾十位專家聚集在一起圍繞DNA條形碼這一新興科學(xué),就“DNA條形碼技術(shù)可以普遍適用于昆蟲各個(gè)類群嗎”、“COI可以作為鑒定動(dòng)物的標(biāo)記基因嗎”、“影響DNA條形碼區(qū)分物種的精確性的因素有哪些”等方面展開了深入討論。

  那該技術(shù)具有哪些特點(diǎn)和優(yōu)勢?物種鑒定可靠么?用哪個(gè)基因或一段非編碼的DNA片段來做標(biāo)記?

  DNA條形碼識別系統(tǒng),能成為一種快捷、精確、自動(dòng)化、全球通用的分類鑒定工具嗎?

  野外露營時(shí),被不知名的蟲子咬了一口,擔(dān)心是否有毒?

  只需用隨身攜帶的DNA條形碼掃描儀輕輕刷一下小蟲子,儀器上顯示它的名稱等信息。還想了解更多?你可以上網(wǎng),在全球通用的物種DNA條形碼數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索,了解這一物種的特性及應(yīng)對方法。這再也不是遙不可及的夢想。

  這就是DNA條形碼技術(shù)。

  ——現(xiàn)狀——

  傳統(tǒng)分類方式已無法滿足需求

  中國科學(xué)院動(dòng)物研究所研究員喬格俠介紹,按最保守估計(jì),目前地球上已知物種有1000萬,一個(gè)人基于形態(tài)學(xué)能夠辨認(rèn)的物種不過1000種。而且,目前基于形態(tài)學(xué)的手段辨認(rèn)物種相對比較復(fù)雜,效率低,需要很長時(shí)間,過多依賴于經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行判斷。如果按照傳統(tǒng)的測算方法鑒定,可能需要1500年,甚至1.5萬年,才有可能完成全球基本的生物物種的編目。

  現(xiàn)在,全世界急需尋找一種快捷、精確、自動(dòng)化、全球通用的分類鑒定工具,建立一個(gè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的、以DNA條形碼為基礎(chǔ)的識別系統(tǒng)。但是,針對生物界有150多萬種物種,DNA條形碼識別系統(tǒng)的建立工作十分艱難。

  ——困境——

  建立統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)并非易事

  確立DNA條形碼分4步:首先,對標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定;隨后,確認(rèn)標(biāo)本來源是否涵蓋現(xiàn)有的該物種的分布區(qū)域;再次,確認(rèn)研究的物種的數(shù)目是否足以反映該類群的整體情況;最終,確保測序的準(zhǔn)確性和覆蓋度。

  “從條形碼本身來講,物品的條形碼是唯一的。但是對于生物來說,我們所用的條形碼不是人為編制的,是形成的一個(gè)基因序列。在不同的物種間和物種內(nèi)有變異的范圍,唯一性不強(qiáng)。”據(jù)南開大學(xué)昆蟲學(xué)研究所研究員卜文俊介紹。

  “現(xiàn)在的做法是,變異范圍是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)值,比如2%、3%的序列差異。”卜文俊介紹,分子體現(xiàn)的是同一物種下的多樣性,而如何記載同一物種中的大量的變異問題。是換成不同的物種記載,還是記載物種下的變異類型?這成為DNA條形碼工作中的難點(diǎn)。

  此外,由于DNA條形碼選擇600個(gè)基因左右長度隊(duì)伍中進(jìn)行標(biāo)記確認(rèn),而有些物種并不能提供這樣長度的、連續(xù)的基因。而對于另外某些物種來說,600個(gè)基因的長度又不足以確定其物種的屬性。因此,如何選擇所有物種通用的基因長度標(biāo)準(zhǔn)又成了DNA條形碼的挑戰(zhàn)。

  從分子角度看,由于選定的基因只是體現(xiàn)了一部分的分子多樣性,還有大量的分子多樣性體現(xiàn)在其他的基因上。因此,在認(rèn)識物種的過程中,需要結(jié)其他數(shù)據(jù)進(jìn)行確定。

  ——目標(biāo)——

  建立全球統(tǒng)一數(shù)據(jù)庫

  喬格俠說:“DNA條形碼序列應(yīng)該提交到專門的條形碼數(shù)據(jù)庫中。重要的是,根據(jù)DNA條形碼進(jìn)行物種識別的前提條件是已經(jīng)測得并建立了相關(guān)類群所有物種的條形碼標(biāo)記的數(shù)據(jù)庫。”

 

  然而,建立公共數(shù)據(jù)庫,并不像想象中的那么容易。根據(jù)卜文俊介紹,建立一個(gè)庫需要很多的要素,地理分布、照片、生物學(xué)的記載、系統(tǒng)發(fā)育或者是種群學(xué)的數(shù)據(jù),還需要跟其他大的數(shù)據(jù)庫進(jìn)行連接。“也許這個(gè)庫最終不是一個(gè)單一的庫,而是生物多樣性記載的一個(gè)庫。分子的數(shù)據(jù)通過條形碼來體現(xiàn)。”

  對于這個(gè)數(shù)據(jù)庫的特性,卜文俊則說:“它應(yīng)該是一個(gè)公共的數(shù)據(jù)庫,全球參與。”在數(shù)據(jù)庫建好之后,也可以引入商業(yè)機(jī)構(gòu),進(jìn)行基于數(shù)據(jù)庫的其他分析。

  如何向這樣的數(shù)據(jù)庫中添加內(nèi)容?喬格俠描述了理想架構(gòu)及建構(gòu)流程:第一,依托于收藏機(jī)構(gòu),掌握各種標(biāo)本材料,便于分析判斷;第二步,通過技術(shù)手段獲取DNA信息及相關(guān)信息;第三步,對獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行挖掘分析;第四步,將相關(guān)信息及標(biāo)記序列提交到已經(jīng)建立的共享平臺數(shù)據(jù)庫中;最后,再由分類學(xué)家進(jìn)行物種鑒定,同時(shí)提供形態(tài)學(xué)、生物學(xué)的信息,并對結(jié)果進(jìn)行校對。

  ——措施——

  優(yōu)先發(fā)展緊急物種

  “曾經(jīng)出現(xiàn)過這樣的情況,某地發(fā)生鼠疫,當(dāng)?shù)匾恢卑凑赵蟹椒ㄟM(jìn)行控制,但2年后才發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的鼠疫發(fā)源地,結(jié)果DNA條形碼工作鑒定后,人們才知道這個(gè)物種根本不是原先想的物種。”中國疾病控制中心傳染病研究所研究員劉起勇說起這樣的事情時(shí),不無遺憾。當(dāng)大規(guī)模流行病或疫情來臨時(shí),如何確定流行病或疫情的病源,成為了防疫控制工作的第一步。

  據(jù)劉起勇介紹,在常規(guī)病媒生物監(jiān)測和病原地調(diào)查和疫情處理過程中,需要在現(xiàn)場處理大量標(biāo)本,而且標(biāo)本鑒定不能做到細(xì)致準(zhǔn)確。全國曾有一萬人從事媒介生物建設(shè),但這里面真正能進(jìn)行準(zhǔn)確分類的不到1%,分布也很不均衡。“當(dāng)緊急情況來臨時(shí),不可能在短時(shí)間內(nèi)有很多分類學(xué)家到現(xiàn)場去工作。現(xiàn)在越來越要尋求一種對于分類專業(yè)依賴性較小的技術(shù),那就是DNA條形碼技術(shù)。”劉起勇肯定地說。

  在疾病控制中,DNA條形碼技術(shù)用于標(biāo)本和樣品的準(zhǔn)確鑒定和分類,也可以做進(jìn)一步分類調(diào)查,確定該物種是不是病原。隨著分子生物學(xué)技術(shù)成本不斷降低,通過基因序列分析進(jìn)行標(biāo)本的鑒定將成為主要手段。

  據(jù)劉起勇介紹,我國的疾病系統(tǒng)每年都要大量的媒介生物標(biāo)本和樣品進(jìn)行鑒定,DNA條形碼主要用于建立條形碼數(shù)據(jù)庫。“我們對內(nèi)容做了一個(gè)規(guī)劃,爭取三到五年的時(shí)間,對主要的病原微生物建立DNA條形碼和標(biāo)準(zhǔn)。隨后,再用三到五年的時(shí)間,在全國較發(fā)達(dá)地區(qū)進(jìn)行推廣,或者有意愿的地區(qū)進(jìn)行推廣,在疾控系統(tǒng)逐步形成DNA條形碼數(shù)據(jù)庫和DNA條形碼分類鑒定技術(shù)。”

  除了常規(guī)病媒外,對重要保護(hù)動(dòng)物、農(nóng)林害蟲等進(jìn)行DNA條形碼的鑒定也十分緊迫。建立覆蓋全球已知所有物種的數(shù)據(jù)庫并非一朝一夕之事,于是,優(yōu)先發(fā)展那些稀缺的、重要的物種DNA條形碼鑒定,就成為了目前科學(xué)家實(shí)行的優(yōu)先策略。

  這些物種你認(rèn)識嗎?如果應(yīng)用DNA條形碼技術(shù),你就會很輕松地區(qū)分它們。

■ 對話專家

  DNA條形碼如何在中國啟動(dòng)?

  科技日報(bào):現(xiàn)在我國DNA條形碼工作在國際上處于一個(gè)什么樣的水平?

  喬格俠(中國科學(xué)院動(dòng)物研究所研究員):我國在世界DNA條形碼方面跟進(jìn)很快,我國是生物條形碼協(xié)會(Consortium for the Barcode of Life)的成員,而且起步很早,跟國際水平基本不相上下。

  科技日報(bào):我國目前有多少科學(xué)家從事這項(xiàng)事業(yè)?

  喬格俠:中國條形碼委員會北方中心的負(fù)責(zé)人,推動(dòng)了很多工作。我統(tǒng)計(jì)過,有幾個(gè)國家基金也在支持做這個(gè)工作,但是從目前來看沒有一個(gè)統(tǒng)一的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)。所以這樣就是,你做你的,我做我的,最終這些數(shù)據(jù)很難發(fā)揮作用的。

  我們工作能夠標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化,是非常有益的。這對于DNA條形碼技術(shù)有一定的要求。用什么樣的規(guī)范做,包括從標(biāo)準(zhǔn)的采集和選取,包括信息的搜集、錄入、規(guī)范等,還包括DNA條形碼分子流程。

  這個(gè)工作最終形成有關(guān)中國的完整的DNA條形碼技術(shù)規(guī)程。我們畢竟跟國外不一樣,實(shí)驗(yàn)室比較小,比較分散。在加拿大,他們類似于有DNA條形碼的“工廠”去測序,這和我們的階段是不一樣的。所以這個(gè)技術(shù)規(guī)程對我們未來DNA條形碼是有幫助的。

  科技日報(bào):對于DNA條形碼在我國的啟動(dòng)策略,您有什么建議和想法?

  喬格俠:對于類型啟動(dòng)的策略方面,至少要分類基礎(chǔ)好。如果不考慮應(yīng)用價(jià)值,但是分類基礎(chǔ)好,這一塊我就可以優(yōu)先啟動(dòng);如果考慮應(yīng)用價(jià)值,對于農(nóng)林害蟲、藥用昆蟲、媒介昆蟲、傳粉昆蟲、重要保護(hù)動(dòng)物、具有重要理論價(jià)值的物種,可以優(yōu)先啟動(dòng)。

  要想把這個(gè)推得讓國家重視,基于應(yīng)用價(jià)值,先啟動(dòng)做,應(yīng)用學(xué)逐步就可以跟進(jìn),這是一個(gè)策略。另外,中國DNA條形碼的數(shù)據(jù)庫平臺,在中國南方中心和北方中心共同努力下,這個(gè)節(jié)點(diǎn)已經(jīng)建成了,跟加拿大總體結(jié)構(gòu)是一致的。

  我們國家現(xiàn)在啟動(dòng)類群還是比較少,思想轉(zhuǎn)變還是相對比較慢,另外在項(xiàng)目支持方面,目前僅僅都是一些優(yōu)先的種子基金。

 
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